發(fā)布時(shí)間: 2022-05-25 點(diǎn)擊次數(shù): 697次
小鼠的灌胃給藥技術(shù)指導(dǎo)
從新藥研發(fā)角度來(lái)說(shuō),因口服給藥是方便、經(jīng)濟(jì)安全的方式,在研究中較常用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,灌胃是口服給藥常用的方法,然而,看似簡(jiǎn)單的幾步,可對(duì)于初學(xué)者常常因?yàn)槭址ú划?dāng)而傷到氣道或食道,進(jìn)而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實(shí)驗(yàn)中,我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢?下面一起來(lái)看看!
灌胃: 借助器械(灌胃針)將藥物直接灌入動(dòng)物胃內(nèi);
藥物循環(huán)途徑:食管→胃→小腸→小腸毛細(xì)血管(吸收入血)→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進(jìn)入血液循環(huán)。
特點(diǎn):
安全性高:各種給藥方式中,口服給藥是安全的;
可選的劑型比較多:只要保證藥物是均勻且穩(wěn)定即可;
給藥體積大:小鼠:0.1-0.8ml(0.2 ml /10g);大鼠:1-3ml。
生物利用度低:藥物經(jīng)胃腸道吸收,并存在胃腸道首過(guò)代謝和肝臟首過(guò)代謝,生物利用率相對(duì)較低,僅為靜脈的25-30%;對(duì)于部分化合物吸收不恒定,誤差較大。
灌胃的實(shí)驗(yàn)步驟
一、準(zhǔn)備工具
8/9/12號(hào)灌胃針頭配套1.0 ml注射器;如下圖為9號(hào)灌胃針頭/1.0 ml注射器,為了防止插入時(shí)造成損傷,針頭呈倒水滴型。
號(hào)灌胃針頭/1.0ml注射器
注:
灌胃針的分類:如下圖為小鼠灌胃常見(jiàn)灌胃針類別,根據(jù)尺寸不同有8/9/12號(hào);另外還有直頭和彎頭區(qū)別;
灌胃針的選擇:尺寸大小的選擇一般可根據(jù)小鼠的年幼決定,如<30g,建議用8、9號(hào);30g以上可選擇12號(hào);其中9號(hào)針頭直徑小于常規(guī)的大頭,特別適用幼鼠;直頭彎頭可根據(jù)個(gè)人習(xí)慣選擇,初學(xué)者建議先適用彎頭練習(xí);
灌胃針的獲取:可直接購(gòu)買,不建議手動(dòng)處理的注射器針頭,易刺傷小鼠食道;
灌胃針的深度:因?yàn)閯?dòng)物有個(gè)體差異,實(shí)驗(yàn)前可先測(cè)量小鼠口腔至胃的距離,進(jìn)而選擇合適長(zhǎng)度的灌胃針,避免插入過(guò)深或過(guò)淺。小鼠入針一般3-4cm,大鼠一般4-6cm。
二、操作步驟
固定小鼠:用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚,用左手的無(wú)名指和小指夾其背部皮膚和尾部,使其頭、頸和身體在一條直線;若第一次抓取時(shí)不得當(dāng),一定要放開(kāi)重抓,以免影響后續(xù)操作;
進(jìn)針:右手持注射器(1ml的注射器配灌胃針頭),從一側(cè)嘴角進(jìn)針,輕壓舌根,輕輕向前推,進(jìn)入食管后會(huì)感覺(jué)有個(gè)刺空感,緩慢推進(jìn),一般當(dāng)針插入小鼠3~4cm,即灌胃針的3/4時(shí)即可注射;
注意: 若感到阻力或動(dòng)物掙扎比較厲害時(shí),說(shuō)明插錯(cuò)位置,應(yīng)馬上停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬觯淮齽?dòng)物恢復(fù)平靜后,再次嘗試。